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牛巨細(xì)胞病毒探針法熒光定量PCR試劑盒實(shí)驗(yàn)操作

牛巨細(xì)胞病毒探針法熒光定量PCR試劑盒實(shí)驗(yàn)操作:1.模板制備（樣本制備區(qū)）建議使用配套水生動(dòng)物病害基因組DNA/RNA提取試劑盒系列產(chǎn)品，具體過程詳見產(chǎn)品說明書。2．添加模板（模板添加區(qū)，放置于冰盒中進(jìn)行）請于-20℃條件下保存，有效期12個(gè)月取出所需測試數(shù)的已含有反應(yīng)液A-TSV-I的PCR管，將試劑*解凍，離心30秒，在管蓋上標(biāo)記管名（陰性對照管NG、樣品XX、陽性對照管PG）。打開管蓋向各管管底分別加入0.8μLB-I及0.2μLR-I，蓋上陰性對照管管蓋，其他各管分別...

核糖體蛋白S6激酶1抗體的制備過程

核糖體蛋白S6激酶1抗體的制備過程：1.免疫原：普通的大分子蛋白，通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白，純化鑒定后可直接作為免疫原；小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原，常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。2.免疫動(dòng)物：常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等，大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。3.免疫血清的收集：一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血，家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血，家...

保加利亞乳桿菌操作流程

保加利亞乳桿菌操作流程：菌株復(fù)蘇：（按三區(qū)劃線法將留菌管內(nèi)的原始菌株進(jìn)行復(fù)蘇）1)所有菌株，顯色培養(yǎng)基分4區(qū)，每區(qū)一株，標(biāo)明菌株號、菌種名常用縮寫如下：cal:白念珠菌cgl：光滑念珠菌cpa:近平滑念珠菌ctr:熱帶念珠菌ckr:克柔念珠菌cne:新型隱球菌，其他菌種標(biāo)記全名。2)隱球菌除傳顯色培養(yǎng)基以外，另傳1/2塊血平皿上述菌株統(tǒng)一37oC孵育48h菌種鑒定：（48h后觀察結(jié)果）。簡單保存法，將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)...

狼源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒?檢測方法步驟

狼源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒檢測方法步驟：(1)將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。其中步驟(1...

人新喋呤(NEOP)ELISA試劑盒操作步驟

人新喋呤(NEOP)ELISA試劑盒操作步驟：1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。4.除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干...

熒光定量PCR試劑盒在哪些領(lǐng)域可開展實(shí)踐？

熒光定量PCR技術(shù)及熒光定量PCR試劑盒的出現(xiàn)，大大簡化了定量檢測的過程，而且真正實(shí)現(xiàn)了絕對定量。多種檢測系統(tǒng)的出現(xiàn)，使實(shí)驗(yàn)的選擇性更強(qiáng)。自動(dòng)化操作提高了工作效率，反應(yīng)快速、重復(fù)性好、靈敏度高、特異性強(qiáng)、結(jié)果清晰。隨著生物芯片技術(shù)和熒光探針定量技術(shù)的結(jié)合，熒光定量PCR在醫(yī)學(xué)檢測及其他各個(gè)領(lǐng)域中的應(yīng)用前景將更加廣闊。盡管如此我們也應(yīng)清晰認(rèn)識到，F(xiàn)Q-PCR技術(shù)在我國各個(gè)研究領(lǐng)域的應(yīng)用并不多見，這就需要我們更充分地推廣該技術(shù)，以推動(dòng)研究工作的快速發(fā)展。熒光定量PCR技術(shù)是通過熒...

大鼠琥珀酸；丁二酸ELISA檢測試劑盒樣本處理及要求

大鼠琥珀酸；丁二酸ELISA檢測試劑盒樣本處理及要求1.血清：將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時(shí)或4℃過夜，然后1000×g離心20分鐘，取上清即可，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。2.血漿：用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本，并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。3.組織勻漿：用預(yù)冷的PBS(0.01M,pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中...

細(xì)菌專用蛋白酶抑制劑混合液反應(yīng)五要素

細(xì)菌專用蛋白酶抑制劑混合液反應(yīng)五要素：參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列，就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：①引物長度：15-30bp，常用為20bp左右。②引物擴(kuò)增跨度：以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。③引物堿基：G+C含...